ISOLASI BAKTERI TEKNIK CAWAN GORES

Praktikum ke-2                                                                        Asleb : Afrita Jayati

Jum’at, 12 April 2013

ISOLASI BAKTERI TEKNIK CAWAN GORES

Laporan Praktikum Mata Kuliah Mikrobiologi

DENI SAPUTRA

4443110373

JURUSAN PERIKANAN

FAKULTAS PERTANIAN

UNIVERSITAS SULTAN AGENG TIRTAYASA

2 0 1 3

ABSTRAK

Telah dilakukan isolasi bakteri terhadap sampel usus ikan daging ikan dan insang ikan, dengan media TSA (Tryptic Soy Agar) dan TSB (Tryptic Soya Borth)  pada 12 April 2013 di Laboratorium teknologi pengolahan hasil perikanan Jurusan Perikanan Universitas Sultan Ageng Tirtayasa. Metode yang digunakan yaitu metode cawan gores. Isolasi bakteri merupakan suatu cara untuk memisahkan atau memindahkan mikroba tertentu dari lingkungannya sehingga diperoleh kultur murni atau biakan murni. Tujuan praktikum isolasi bakteri dari usus ikan adalah untuk mempelajari cara mengisolasi bakteri dari usus  dengan metode cawan gores serta mengamati koloni bakteri tumbuh. Dimana setelah dilakukan isolasi bakteri pada usus ikan dan jumlah yang di dapat yaitu 58 koloni.

Kata kunci : cawan gores, Isolasi bakteri, Koloni, TSA.

PENDAHULUAN

Dalam kegiatan mikrobiologi pembuatan isolasi dilakukan dengan cara mengambil sampel mikroba dari lingkungan yang ingin diteliti. Dari sampel tersebut kemudian dikultur/dibiakan dengan menggunakan media universal atau media selektif. Dengan isolasi inilah dapat diidentifikasi jenis bakteri tertentu baik dari kelimpahan maupun morfologinya. Isolasi bakteri merupakan suatu cara untuk memisahkan atau memindahkan mikroba tertentu dari lingkungannya sehingga diperoleh kultur murni atau biakan murni. Kultur murni ialah kultur yang sel-sel mikrobanya berasal dari pembelahan dari satu sel tunggal (Pelczar, 1986).

Ada beberapa metode untuk memperoleh biakan murni dari suatu sampel  tertentu. Dua diantaranya yang paling sering digunakan adalah teknik cawan gores dan cawan tuang. Kedua metode ini didasarkan pada prinsip yang sama yaitu mengencerkan organisme sedemikian sedangkan sehingga individu spesies dapat dipisahkan dari lainnya, dengan anggapan bahwa koloni terpisah yang tampak pada cawan petri setelah diinkubasi berasal dari satu sel tunggal. Dan metode lain yang digunakan yaitu cara sebar (spread plate), cara pengenceran (dilution method), serta mikromanipulator (the micromanipulator method) (Lim, 1990).Adapun tujuan dilakukannya praktikum isolasi bakteri ini, untuk mempelajari cara mengisolasi bakteri dengan metode cawan gores, serta mengitung jumlah koloni hasil isolasi bakteri.

METODOLOGI

Praktikum Mikrobiologi dengan materi isolasi bakteri dilaksanakan pada hari jumat, 12 April 2013 mulai pukul 15.30 – 18.00 WIB di Laboraturium teknologi pengolahan hasil perikanan Jurusan Perikanan Fakultas Pertanian Universitas Sultan Ageng Tirtayasa.

Alat-alat yang digunakan dalam praktikum mikrobiologi mengenai isolasi bakteri terdiri dari cawan petri, korek gas, burcen, batang L, lup inokulasi (Ose), dan kaca pembesar. Dan bahan yang digunakan untuk mengisolasi bakteri yaitu dengan menggunakan media TSA (Tryptic Soy Agar), dan bakteri yang sudah di isolasi hasil praktikum isolasi bakteri dengan teknik cawan tuang.

            Prosedur dalam praktikum isolasi bakteri yaitu dengan cara menggunakan metode cawan tuang, sebagai berikut :

Isolasi bakteri

Gores media dengan sampel

Tutup dan panas kan

Tutup dengan cling warp

HASIL DAN PEMBAHASAN

Hasil perhitungan bakteri dapat dilihat pada table berikut:

Tabel 1. Data hasil isolasi bakteri

KELOM POK 1	KELOMPOK 2
Kuadran 0 : 23                                    Kuadran 1 : 45                                    Kuadran 2 : 56                                    Kuadran 3 : 13	kuadran 0 : 19 kuadran 1 : 18 kuadran 2 : 0 kuadran 3 : 0
KELOM POK 3	KELOM POK 4
Kuadran 0 : 0                          Kuadran 1 : 0                                      Kuadran 2 : 0                                      Kuadran 3 : 0	kuadran 0 : 8 kuadran 1 : 6 kuadran 2 : 0 kuadran 3 : 0
KELOM POK 5	KELOM POK 6
Kuadran 0 : 6                                      Kuadran 1 : 25                                    Kuadran 2 : 0                                      Kuadran 3 : 0	kuadran 0 : 5 kuadran 1 : 22 kuadran 2 : 1 kuadran 3 : 4

Dari data tabel 1. Berdasarkan praktikum isolasi bakteri yang telah dilakukan dalam praktikum mikrobiologi dengan menggunakan metode cawan gores. Dan hasilnya didapati bahwa terjadi perbedaan jumlah koloni dari setiap kuadran, setelah diinkubasi selama 24 jam dalam suhu ruang. Hasil dari penggoresan kuadran yaitu pada kuadran 0 terdapat 19 koloni.  Pada kuadran I 18 koloni. Kemudian pada kuadran II dan III koloni, tidak ditemukan koloni bakteri. Ciri dari koloni bakteri ini adalah, Bau busuk, bentuk bulat menyebar, warna putih kekuningan

Perbedaan jumlah koloni tersebut memberikan gambaran bahwa dalam melakukan isolasi bakteri selalu bekerja aseptis supaya tidak terjadinya kontaminasi dari lingkungan tersebut. Faktor-faktor yang mempengaruhi pertumbuhan bakteri yaitu suplai zat gizi, Waktu Pertumbuhan bakteri membentuk suatu kurva atau fase logritmik. Suhu, Nilai pH untuk pertumbuhan bakteri antara pH 6,0-8,0, Dan ketersediaan oksigen.

KESIMPULAN

            Dari hasil dan pembahasan dapat di simpulkan bahwa pada praktikum isolasi bakteri dengan metode cawan gores ini mudah dan dapat di praktikan langsung oleh praktikan, sedangkan jumlah hasil isolasi bakteri masing masing kuadran yaitu, kuadran I, 19 koloni, kuadran II 18 koloni, sedangkan kuadran II dan kuadran III tidak di temukan koloni bakteri, dan ciri dari koloni yang di temukan yaitu, Bau busuk, bentuk bulat menyebar, warna putih kekuningan.

DAFTAR PUSTAKA

Dwidjoseputro. 1964. Dasar – dasar Mikrobiologi. Jakarta : Djambatan

Hadioetomo, RS. 1993. Mikrobiologi dasar dalam praktek: Teknik dan prosedur dasar laboratorium. Gramedia pustaka utama. Jakarta.

Suriawiria, U. 2005. Mikrobiologi dasar. Papas Sinar Sinanti, Jakarta

Zubaidah, Elok. 2006. Mikrobiologi umum. Universitas Brawijaya. Malang

LAMPIRAN

    

             Pemberian kuadran                                        alat dan bahan

   

               Penggoresan bakteri                                     pembakaran sampel

   

            Selesai penggoresan                                        sampel siap di inkubasi

SELEKTIVITAS PROBIOTIK DENGAN UJI HIDROLISIS ENZIM

Praktikum ke   :  7 ( Tujuh )                                        Mata kuliah     : Mikrobiologi

Hari / tanggal  : Jumat / 24 mei 2013                          Asisten            : Nidatul Janah

SELEKTIVITAS PROBIOTIK DENGAN UJI HIDROLISIS ENZIM

Oleh :

Bela sumartina

4443110018

JURUSAN PERIKANAN

FAKULTAS PERTANIAN

UNIVERSITAS SULTAN AGENG TIRTAYASA

2013

 

ABSTRAK

mikrobiologi adalah suatu cabang ilmu biologi yang mempelajari tentang mikroorganisme dan interaksi mereka dengan organisme lain dan lingkungannya. (singleton.2006). probiotik adalah bakteri hidup yang diberikan sebagai suplemen makanan yang mempunyai pengaruh menguntungkan pada kesehatan pada manusia dan binatang, dengan memperbaiki keseimbangan mikroflora intestinal. mikrofolora yang digolongkan sebagai probiotik adalah yang memproduksi asam laktat terutama dari golongan lactobacilli dan bifidobacteria. prebiotik adalah nondigestible food ingredient (komponen pangan yg tidak dapat dicerna oleh enzim-enzim pencernaan) yang mempunyai pengaruh baik terhadap host dengan memicu aktivitas, pertumbuhan yang selektif, atau keduanya terhadap satu jenis atau lebih bakteri penghuni kolon. Berdasarkan hasil yang di peroleh dari selektivitas probiotik dengan uji hidrolisis enzim, pada media TSA + Pati yang ditusuk dengan menggunakan tusuk sate yang sebelumnya di celupkan pada biakan probiotik TSB dan di peram dalam incubator selama 1 x 24 jam, setelah di amati diperoleh diameter 1 cm. Alat yang digunakan pada praktikum ini adalah tusuk sate, cawan petri, erlen meyer, buncen. Adapun bahan yang digunakan adalah pati, alkohol, TSB dan TSA, dilaksanakan pada hari Jum’at, tangga  24 mei 2013 mulai   pukul 10:00 WIB s/d selesai. Adapun tempat pelaksanaan di labotarium Teknologi Pengolahan Hasil Perikanan Fakultas Pertanian Universitas Sultan Ageng Tirtayasa, Serang Banten.

Kata kunci : bakteri, enzim,  probiotik, prebiotik

1.PENDAHULUAN

1.1  Latar Belakang

Mikrobiologi adalah suatu cabang ilmu biologi yang mempelajari tentang mikroorganisme dan interaksi mereka dengan organisme lain dan lingkungannya. (Singleton.2006).

Mikroba ialah jasad renik yang mempunyai kemampuan sangat baik untuk bertahan hidup. Jasad tersebut dapat hidup hampir di semua tempat di permukaan bumi. Mikroba mampu beradaptasi dengan lingkungan yang sangat dingin hingga lingkungan yang relative panas, dari ligkungan yang asam hingga basa. Berdasarkan peranannya, mikroba dapat dikelompokkan menjadi dua, yaitu mikroba menguntungkan dan mikroba merugikan (Afriyanto 2005).

Mikroorganisme adalah makhluk hidup yang memiliki aktivitas yang berupa tumbuh dan berkembang. Kadang kala pertumbuhan dan perkembangan mikroorganisme ini terganggu. Hal ini dapat dipengaruhi baik dari mikroba itu sendiri ataupun dari luar. Salah satu pengaruh yang paling berkompoten adalah antimikroba (Gobel, 2008).

Probiotik adalah bakteri hidup yang diberikan sebagai suplemen makanan yang mempunyai pengaruh menguntungkan pada kesehatan pada manusia dan binatang, dengan memperbaiki keseimbangan mikroflora intestinal. Mikrofolora yang digolongkan sebagai probiotik adalah yang memproduksi asam laktat terutama dari golongan Lactobacilli dan Bifidobacteria.

Kritera Probiotik yang efektif ialah : 1) memberikan efek yang menguntungkan pada host, 2) tidak patogenik dan tidak toksik, 3) mengandung sejumlah besar sel hidup, 4) mampu bertahan dan melakukan kegiatan metabolisme dalam usus, 5) tetap hidup selama dalam penyimpanan dan waktu digunakan, 6) mempunyai sifat sensori yang baik, 7) diisolasi dari host. Sedangkan efek kesehatan yang menguntungkan dari probiotik adalah : 1) memperbaiki keluhan malabsorsi laktosa, 2) meningkatkan ketahanan alami terhadap infeksi di usus, 3) supresi kanker, 4) mengurangi kadar kholesterol darah, 5) memperbaiki pencernaan, 6) stimulasi imunitas gastrointestinal.    Prebiotik adalah nondigestible food ingredient (komponen pangan yg tidak dapat dicerna oleh enzim-enzim pencernaan) yang mempunyai pengaruh baik terhadap host dengan memicu aktivitas, pertumbuhan yang selektif, atau keduanya terhadap satu jenis atau lebih bakteri penghuni kolon. Prebiotik pada umumnya adalah karbohidrat yang tidak dicerna dan tidak diserap, biasanya dalam bentuk oligosakarida dan seat pangan. Food ingredient yang diklasifikasikan sebagai prebiotik harus:

1) Tidak dihidrolisa dan tidak diserap dibagian atas traktus gastrointestinal sehingga dapat mencapai kolon tanpa mengalami perubahan struktur dan tidak diekskresikan dalam feses.

2) Substrat yang selektif untuk satu atau sejumlah mikroflora yang menguntungkan dalam kolon, jadi memicu pertumbuhan bakteria.

3) Mampu merubah mikroflora kolon menjadi komposisi yang menguntungkan kesehatan.

Sinbiotik (Eubiotik) adalah kombinasi probiotik dan prebiotik. Penambahan mikroorganisme hidup (probiotik) dan substrat (prebiotik) untuk pertumbuhan bakteri misalnya fructooligosaccharide (FOS) dengan bifidobacterium atau lactitol dengan lactobacillus. Keuntungan dari kombinasi ini adalah meningkatkan daya tahan hidup bakteri probiotik oleh karena substrat yang spesifik telah tersedia untuk fermentasi sehingga tubuh mendapat manfaat yang lebih sempurna dari kombinasi ini.

1.2  Tujuan

      Adapun tujuan dari praktikum mikrobiologi tentang selektifitas probiotik dengan uji hidrolisis enzim adalah agar seluruh mahasiswa mengetahui pengaruh selektifitas probiotik dengan uji hidrolisis enzim.

2.METODOLOGI

2.1  Waktu dan Tempat

            Adapun praktikum Mikrobiologi Perairan tentang “selektifitas probiotik dengan uji hidrolisis enzim ”.  Yang dilaksanakan pada hari Jum’at, tangga  24 mei 2013 mulai   pukul 10:00 WIB s/d selesai. Adapun tempat pelaksanaan di labotarium Teknologi Pengolahan Hasil Perikanan Fakultas Pertanian Universitas Sultan Ageng Tirtayasa, Serang Banten.

2.2  Alat dan Bahan

            Alat yang digunakan pada praktikum ini adalah tusuk sate, cawan petri, erlen meyer, buncen. Adapun bahan yang digunakan adalah pati, alkohol, TSB dan TSA.

2.3  Prosedur Kerja

            Langkah kerja

TSA + Pati

Biakan probiotik TSB

Celupkan tusuk sate pada biakan probiotik TSB

Tusukan tusuk sate pada media TSA

Peram dalam inkubator selama 1 x 24 jam

Amati

3.HASIL DAN PEMBAHASAN

3.1 Hasil pengamatan

Tabel. selektifitas probiotik dengan uji hidrolisis enzim

KELOMPOK	SAMPEL	DIAMETER TUSUK SATE (CM)
1 2 3 4 5 6	MEDIA TSA + PATI MEDIA TSA + PATI MEDIA TSA + PATI MEDIA TSA + PATI MEDIA TSA + PATI MEDIA TSA + PATI	0,4 0,9 1,5 1 1 0,8

3.2  Pembahasan

Berdasarkan hasil yang di peroleh dari selektivitas probiotik dengan uji hidrolisis enzim, pada media TSA + Pati yang ditusuk dengan menggunakan tusuk sate yang sebelumnya di celupkan pada biakan probiotik TSB dan di peram dalam incubator selama 1 x 24 jam, setelah di amati diperoleh diameter 1 cm.

Perlu di ketahui bahwa probiotik adalah bakteri hidup yang diberikan sebagai suplemen makanan yang mempunyai pengaruh menguntungkan pada kesehatan pada manusia dan binatang, dengan memperbaiki keseimbangan mikroflora intestinal. mikrofolora yang digolongkan sebagai probiotik adalah yang memproduksi asam laktat terutama dari golongan lactobacilli dan bifidobacteria.

prebiotik adalah nondigestible food ingredient (komponen pangan yg tidak dapat dicerna oleh enzim-enzim pencernaan) yang mempunyai pengaruh baik terhadap host dengan memicu aktivitas, pertumbuhan yang selektif, atau keduanya terhadap satu jenis atau lebih bakteri penghuni kolon. prebiotik pada umumnya adalah karbohidrat yang tidak dicerna dan tidak diserap, biasanya dalam bentuk oligosakarida dan seat pangan.

4.KESIMPULAN

            Tujuan dari praktikum mikrobiologi tentang selektifitas probiotik dengan uji hidrolisis enzim adalah agar seluruh mahasiswa mengetahui pengaruh selektifitas probiotik dengan uji hidrolisis enzim. Pengertian probiotik adalah bakteri hidup yang diberikan sebagai suplemen makanan yang mempunyai pengaruh menguntungkan pada kesehatan pada manusia dan binatang, dengan memperbaiki keseimbangan mikroflora intestinal. mikrofolora yang digolongkan sebagai probiotik adalah yang memproduksi asam laktat terutama dari golongan lactobacilli dan bifidobacteria. Prebiotik adalah nondigestible food ingredient (komponen pangan yg tidak dapat dicerna oleh enzim-enzim pencernaan) yang mempunyai pengaruh baik terhadap host dengan memicu aktivitas, pertumbuhan yang selektif, atau keduanya terhadap satu jenis atau lebih bakteri penghuni kolon. prebiotik pada umumnya adalah karbohidrat yang tidak dicerna dan tidak diserap, biasanya dalam bentuk oligosakarida dan seat pangan.

DAFTAR PUSTAKA

      Chatim, 1994, Sterilisasi dan Disininfeksi dalam Buku Ajar Mikrobiologi    Kedoteran,      Edisi Revisi, Bina rupa Aksara, Jakarta,85-103.

      Hardjasasmita, Panjita. 2000. Ikhtisar Biokimia Dasar B. Jakarta: Balai Penerbit     FKUI.

      Istiantoro, 1995, Penisilin, Sefalosporin dan Atibiotik Betalaktam Lainnya dalam    Farmakologi dan Terapi, Edisi IV, Bagian Farmakologi dan Terapi FKUI,          Jakarta, 563.

      Jawetz, Melnick., dan Adelberg, 2001, Mikrobiologi Kedokteran Buku 1, Salemba             Medika, Surabaya132-139.

      Poedjadi, Anna. 1994. Dasar-Dasar Biokimia.  Jakarta: Penerbit Universitas          Indonesia (UI - Press).

      Setiabudy, 1995, Antimikroba Golongan Tetrasiklin dan Kloramfenikol dalam                    Farmakologi dan Terapi, Edisi IV, Bagian Farmakologi dan Terapi FKUI,       Jakarta, 651-657.

      W. Lay., Bibiana, 1994, Analisis Mikroba di Laboratorium, Raja Gravindo             Persada, Jakarta 69-97. 

     

                                          

LAMPIRAN

   alat dan bahan                                             proses penutupan

proses penusukan                                            pembakaran tusuk sate