Deni Saputra: ISOLASI BAKTERI

Praktikum ke-2 Asleb : Afrita Jayati

Jum’at, 5 April 2013

ISOLASI BAKTERI

Laporan Praktikum Mata Kuliah Mikrobiologi

DENI SAPUTRA

4443110373

JURUSAN PERIKANAN

FAKULTAS PERTANIAN

UNIVERSITAS SULTAN AGENG TIRTAYASA

2 0 1 3

ABSTRAK

Telah dilakukan isolasi bakteri terhadap sampel usus ikan daging ikan dan insang ikan, dengan media TSA (Tryptic Soy Agar) dan TSB (Tryptic Soya Borth) pada 5 April 2013 di Laboratorium teknologi pengolahan hasil perikanan Jurusan Perikanan Universitas Sultan Ageng Tirtayasa. Metode yang digunakan yaitu metode cawan tuang. Isolasi bakteri merupakan suatu cara untuk memisahkan atau memindahkan mikroba tertentu dari lingkungannya sehingga diperoleh kultur murni atau biakan murni. Tujuan praktikum isolasi bakteri dari usus ikan adalah untuk mempelajari cara mengisolasi bakteri dari usus dengan metode cawan tuang serta mengamati c koloni bakteri tumbuh. Dimana setelah dilakukan isolasi bakteri pada usus ikan dan jumlah yang di dapat yaitu 58 koloni.

Kata kunci : cawan tuang, Isolasi bakteri, Koloni, TSA, TSB.

PENDAHULUAN

Dalam kegiatan mikrobiologi pembuatan isolasi dilakukan dengan cara mengambil sampel mikroba dari lingkungan yang ingin diteliti. Dari sampel tersebut kemudian dikultur/dibiakan dengan menggunakan media universal atau media selektif. Dengan isolasi inilah dapat diidentifikasi jenis bakteri tertentu baik dari kelimpahan maupun morfologinya. Isolasi bakteri merupakan suatu cara untuk memisahkan atau memindahkan mikroba tertentu dari lingkungannya sehingga diperoleh kultur murni atau biakan murni. Kultur murni ialah kultur yang sel-sel mikrobanya berasal dari pembelahan dari satu sel tunggal (Pelczar, 1986).

Ada beberapa metode untuk memperoleh biakan murni dari suatu sampel tertentu. Dua diantaranya yang paling sering digunakan adalah teknik cawan gores dan cawan tuang. Kedua metode ini didasarkan pada prinsip yang sama yaitu mengencerkan organisme sedemikian sedangkan sehingga individu spesies dapat dipisahkan dari lainnya, dengan anggapan bahwa koloni terpisah yang tampak pada cawan petri setelah diinkubasi berasal dari satu sel tunggal. Dan metode lain yang digunakan yaitu cara sebar (spread plate), cara pengenceran (dilution method), serta mikromanipulator (the micromanipulator method) (Lim, 1990).Adapun tujuan dilakukannya praktikum isolasi bakteri ini, untuk mempelajari cara mengisolasi bakteri dengan metode cawan tuang, serta mengitung jumlah koloni hasil isolasi bakteri.

METODOLOGI

Praktikum Mikrobiologi dengan materi isolasi bakteri dilaksanakan pada hari jumat, 5 April 2013 mulai pukul 15.30 – 18.00 WIB di Laboraturium teknologi pengolahan hasil perikanan Jurusan Perikanan Fakultas Pertanian Universitas Sultan Ageng Tirtayasa.

Alat-alat yang digunakan dalam praktikum mikrobiologi mengenai isolasi bakteri terdiri dari cawan petri, tabung reaksi, rak tabung reaksi, pipet bulb, korek gas, burcen, batang L, shaker, lup inokulasi (Ose), dan kaca pembesar. Dan bahan yang digunakan untuk mengisolasi bakteri yaitu dengan menggunakan media TSA (Tryptic Soy Agar), TSB (Tryptic Soya Borth), Larutan Visiologi (Larvis), serta sampel usus ikan.

Prosedur dalam praktikum isolasi bakteri yaitu dengan cara menggunakan metode cawan tuang, sebagai berikut :

Isolasi bakteri

5 tabung reaksi

Masukan 0,9 ml larfis kedalam masing-masing tabung reaksi

Ambil 0,1 ml bakteri yang di biakan masukan kedalam tabung reaksi (kocok)

Ambil bakteri 0,1 ml dari tabung reaksi i ke tabung reaksi ii (kocok)

Ambil bakteri 0,1 ml dari tabung reaksi ii ke tabung reaksi iii (kocok)

Ambil bakteri 0,1 ml dari tabung reaksi iii ke tabung reaksi iv (kocok)

Ambil bakteri 0,1 ml dari tabung reaksi iv ke tabung reaksi v (kocok)

Masukan dalam cawan petri

Sebar dengan batang l

Tutup dan panas kan

Tutup dengan cling warp

HASIL DAN PEMBAHASAN

Hasil perhitungan bakteri dapat dilihat pada table berikut:

Tabel 1. Hasil isolasi bakteri

Kelompok	Jumlah Koloni
1	83
2	58
3	96
4	127
5	143
6	96

Dari data tabel 1. Berdasarkan hasil praktikum isolasi bakteri dapat dibahas bahwa pada kelompok 1 dan 2 yaitu asal sampel dari usus ikan, dengan jumlah koloni sebanyak, 83 koloni dan 58 koloni, sedangkan kelompok 3 dan 4 asal sampel dari daging ikan, dengan jumlah koloni yaitu, 96 koloni dan 127 koloni, sedangkan pada kelompok 5 dan 6 asal sampelnya dari insang ikan, dengan jumlah koloni yang di dapat yaitu sebanyak 143 koloni dan 96 koloni. Untuk penghitungan koloninya sebagai berikut:

Untuk usus :

∑ koloni satuan:cfu/mg

Faktor pengenceran X Volume yang disebar X Yang diencerkan

Kel 1. Kel 2.

83 58

10^-5x 10^-1 x 10^-1 10^-5x 10^-1 x 10^-1

= 83 x 10⁷cfu/mg = 58 x 10⁷ cfu/mg

∑ koloni satuan : cfu/ml

Factor pengenceran X Volume yang disebar

Kel 3. Kel 4.

96 127

10^-5x 10^-110^-5x 10^-1

= 96 x 10⁶ cfu/ml = 127 x 10⁶ cfu/ml

Kel 5 Kel 6.

143 96

10^-5x 10^-110^-5x 10^-1

= 143 x 10⁶ cfu/ml = 96 x 10⁶ cfu/ml

Dari perhitungan koloni di dapat kan jumlah koloni yaitu, kelompok satu 83 x 10⁷cfu/mg, kelompok dua 58 x 10⁷ cfu/mg, kelompok tiga 96 x 10⁶ cfu/ml, kelompok empat 127 x 10⁶ cfu/ml, kelompok lima 143 x 10⁶ cfu/ml, serta kelompok enam 96 x 10⁶ cfu/ml.

KESIMPULAN

Dari hasil dan pembahasan dapat di simpulkan bahwa pada praktikum isolasi bakteri dengan metode cawan tuang ini mudah dan dapat di praktikan langsung oleh praktikan, sedangkan jumlah hasil isolasi bakteri masing masing kelompok yaitu, kelompok satu 83 x 10⁷cfu/mg, kelompok dua 58 x 10⁷ cfu/mg, kelompok tiga 96 x 10⁶ cfu/ml, kelompok empat 127 x 10⁶ cfu/ml, kelompok lima 143 x 10⁶ cfu/ml, serta kelompok enam 96 x 10⁶ cfu/ml.

DAFTAR PUSTAKA

Dwidjoseputro. 1964. Dasar – dasar Mikrobiologi. Jakarta : Djambatan

Hadioetomo, RS. 1993. Mikrobiologi dasar dalam praktek: Teknik dan prosedur dasar laboratorium. Gramedia pustaka utama. Jakarta.

Suriawiria, U. 2005. Mikrobiologi dasar. Papas Sinar Sinanti, Jakarta

Zubaidah, Elok. 2006. Mikrobiologi umum. Universitas Brawijaya. Malang